外泌體形成過程概括如下：細胞質(zhì)膜內(nèi)陷，將一些細胞外成分和細胞膜蛋白包裹在一起，形成早期內(nèi)涵體（ESEs），這些內(nèi)涵體可以與其他細胞器發(fā)生物質(zhì)交換，或者不同內(nèi)涵體之間融合形成晚期內(nèi)涵體，進一步形成細胞內(nèi)多膜體（MVBs），其中會包含許多腔內(nèi)囊泡（ILVs），這些腔內(nèi)囊泡就可能會被釋放成為外泌體。

細胞形成多膜體后可能會通過與自噬體或溶酶體融合而被降解，也可能通過與質(zhì)膜融合，釋放其中的物質(zhì)，包括腔內(nèi)囊泡，這些腔內(nèi)囊泡就是最終形成的外泌體。